萝卜咨询：
gst - pull down如何找未知互做蛋白？
拉孜县网友回复：
把A蛋白和GST蛋白一起重组表达后,将这个融合蛋白与细胞裂解液或其他样本反应,如果样本中有能与A蛋白互作的B蛋白就会相互结合,形成一个GST+A+B组合蛋白.然后利用GSH柱特异性的识别GST蛋白,把GST+A+B组合蛋白纯化下来后进行检测.由于GST和A蛋白是你自己重组表达的,所以相关信息你都很清楚,那多出来的数据代表的就是B蛋白,通过序列分析比对就能知道B蛋白是什么,最终你就知道是什么蛋白与A蛋白有互作了.
萝卜咨询：
pull down 什么意思 - ？
拉孜县网友回复：
pull down 摧毁,推翻;拉下来;使……下跌 短语 pull pull down 使人衰弱 ; 拆毁 Pull Shield Down 卸甲 GST Pull-down 相互作用 ; 蛋白沉降实验 ; 与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验 and pull me down 把我拖下水 pull-down list 下拉清单 pull-down ...
萝卜咨询：
有哪些方法可以证明信号通路中两种蛋白存在相互作用?列出4种以上. - ？
拉孜县网友回复：
免疫共沉淀,GST pull down,FRET,BRET, 免疫荧光,酵母双杂交,哺乳动物双杂交等等.
萝卜咨询：
从细胞中提取蛋白质的问题.用 含GSTtag 的DNA去tansfect 细胞,然后用 West blot 检查蛋白表达 然后用 GST pulldown 去获得 表达的蛋白和与之反应的蛋... - 作业帮？
拉孜县网友回复：
[答案] 带GST tag的蛋白体外分离纯化时,GST pulldown过程中,只有带GST的融合蛋白可以特异结合到柱子上,核酸等杂质都随流出液流走了,不会干扰你的实验结果.
萝卜咨询：
如何用vmd软件预测蛋白质之间的作用位点 - ？
拉孜县网友回复：
软件预测毕竟是预测,还需实验检验,建议首先对两种蛋白分子上的典型结构域进行功能位点突变或对蛋白进行分段突变,然后用免疫共沉淀或GST PULL-DOWN方法进行验证.
萝卜咨询：
pull - down assay和免疫共沉淀的区别 - 作业帮？
拉孜县网友回复：
[答案] GST pull-down一般指用一个带GST标签的重组蛋白,与目的蛋白进行孵育,最后用结合GST的Beads拉下相互作用复合物.免疫共沉淀一般是用某一蛋白的抗体,在细胞裂解液中与相应的蛋白结果,用Protein A/G将抗原抗体复合物拉下...
萝卜咨询：
GST pull down 中出现 IB是什么意思 - ？
拉孜县网友回复：
最大的区别就是GSTpull-down技术是利用谷胱甘肽介质和GST融合标签蛋白质之间相互作用结合的.免疫共沉淀技术是利用了ProteinA或者G介质和IgG之间相互作用结合的.这是两组不同的配基与蛋白吸附